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RAW 264.7細(xì)胞功能驗證:吞噬乳膠顆粒與酵母聚糖

更新時間:2025-08-18  |  點擊率:699

RAW 264.7細(xì)胞(別名:RAW264.7、RAW-264.7等)是一種源自Abelson鼠科白血病病毒誘導(dǎo)腫瘤的小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞系,具有典型的巨噬細(xì)胞功能特性。該細(xì)胞系廣泛用于免疫學(xué)、炎癥反應(yīng)及腫瘤微環(huán)境研究,因其無需胰酶消化、易傳代的特點,成為實驗中常用的工具細(xì)胞。

核心特性

種屬:小鼠(Mus musculus)
組織來源:Abelson病毒誘導(dǎo)的腫瘤;單核細(xì)胞/巨噬細(xì)胞起源
生長特性:貼壁生長,禁用胰酶消化(胰酶會誘導(dǎo)分化)
細(xì)胞形態(tài):不規(guī)則形,存在少量分化細(xì)胞(屬正?,F(xiàn)象)
生物安全等級:BSL-2(需在二級生物安全柜操作)



培養(yǎng)方案(默認(rèn)方案A)

培養(yǎng)基配方

  • 基礎(chǔ)培養(yǎng)基:DMEM([PM150210])

  • 添加物:10% FBS([164210]) + 1% 雙抗(青霉素-鏈霉素,[PB180120])

  • 無需額外成分:已包含細(xì)胞生長所需全部營養(yǎng),直接使用

培養(yǎng)條件

  • 氣體環(huán)境:空氣(95%)+ CO?(5%)

  • 溫度:37℃

  • 推薦傳代比例:1:2 至 1:8(根據(jù)細(xì)胞密度調(diào)整)

  • 換液頻率:每2-3天更換新鮮培養(yǎng)基

關(guān)鍵注意事項

  1. 胰酶禁忌:嚴(yán)禁使用胰酶消化!胰酶會刺激細(xì)胞分化,建議用細(xì)胞刮刀輕柔吹打傳代。

  2. 傳代時效性:超過3天未傳代可能導(dǎo)致細(xì)胞自發(fā)分化,需密切監(jiān)控密度。

  3. 分化現(xiàn)象:培養(yǎng)過程中出現(xiàn)少量分化細(xì)胞屬正常,無需過度處理。

  4. 凍存與復(fù)蘇: 

    • 凍存液配方:55% 基礎(chǔ)培養(yǎng)基 + 40% FBS + 5% DMSO

    • 儲存條件:液氮(-196℃)長期保存,避免反復(fù)凍融。

生物學(xué)功能與應(yīng)用場景

  • 吞噬與抗原呈遞:可胞飲中性紅,吞噬乳膠顆?;蚪湍妇厶牵邆渚奘杉?xì)胞典型功能。

  • 免疫調(diào)控研究:LPS或PPD刺激后可誘導(dǎo)紅細(xì)胞分解,適用于炎癥信號通路(如TLR4)研究。

  • 腫瘤微環(huán)境模型:用于模擬巨噬細(xì)胞與腫瘤細(xì)胞相互作用,篩選免疫調(diào)節(jié)藥物。

背景與來源

  • 細(xì)胞起源:由Abelson病毒誘導(dǎo)的小鼠白血病模型建立,表面抗原sIg?、Ia?、Thy-1.2?。

  • 病毒安全性:XC斑點形成試驗陰性,無病毒顆粒分泌。

  • 保藏信息:ATCC(TIB-71)、ECACC(91062702)權(quán)-威機構(gòu)保藏。

推薦操作流程

  1. 傳代步驟: 

    • 吸棄舊培養(yǎng)基,PBS輕洗1-2次。

    • 加入適量新鮮培養(yǎng)基,用細(xì)胞刮刀輕柔刮取貼壁細(xì)胞,吹打分散后分瓶。

  2. 凍存技巧: 

    • 收集對數(shù)期細(xì)胞,離心后重懸于預(yù)冷凍存液,逐步降溫(-1℃/min)后轉(zhuǎn)入液氮。

  3. 復(fù)蘇要點: 

    • 快速融化(37℃水?。?,離心去除DMSO后重懸,避免過度吹打。

RAW 264.7細(xì)胞以其穩(wěn)定的巨噬細(xì)胞功能和便捷的培養(yǎng)特性,成為免疫與腫瘤研究中的理想模型。嚴(yán)格遵循無胰酶操作及傳代時效性,可最大限度維持細(xì)胞活性與功能。


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