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小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞可用于體外藥物模型和系統(tǒng)評價

更新時間:2022-03-21  |  點(diǎn)擊率:1494
  小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞是神經(jīng)膠質(zhì)形成的主要功能細(xì)胞,膠質(zhì)細(xì)胞是在大腦從早期發(fā)育到成熟的轉(zhuǎn)變過程中產(chǎn)生的。當(dāng)程序性細(xì)胞死亡,或大腦發(fā)育過程中,中樞神經(jīng)系統(tǒng)受損或病理性損傷時,膠質(zhì)細(xì)胞可作為大腦中的巨噬細(xì)胞。當(dāng)II類組織相容性復(fù)合物表達(dá)CD-4陽性T細(xì)胞時,膠質(zhì)細(xì)胞可以表達(dá)抗原,可以進(jìn)行FC介導(dǎo)的巨噬細(xì)胞,并與造血細(xì)胞和巨噬細(xì)胞共享抗原。小鼠星形膠質(zhì)細(xì)胞來源于正常小鼠腦組織,經(jīng)胰蛋白酶消化制備。優(yōu)化靶細(xì)胞的生長條件,從而減少對雜細(xì)胞(如脂肪細(xì)胞、成纖維細(xì)胞等)的污染,保證質(zhì)量的穩(wěn)定性。經(jīng)過10代仍能保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài),可用于體外藥物模型和系統(tǒng)評價。
 

小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞

 

  1、首先觀察小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)瓶是否完好,培養(yǎng)基是否有滲漏、混濁現(xiàn)象。
  2、用75%酒精擦拭細(xì)胞培養(yǎng)瓶表面,顯微鏡下觀察細(xì)胞狀態(tài)。由于運(yùn)輸問題,會有少量貼壁細(xì)胞從瓶壁脫落;先不要打開培養(yǎng)瓶的瓶蓋,將細(xì)胞放入細(xì)胞培養(yǎng)箱中培養(yǎng)2-4小時,以穩(wěn)定細(xì)胞狀態(tài)。
  3、仔細(xì)閱讀細(xì)胞說明書,了解細(xì)胞的相關(guān)信息,如粘附特性(粘附/懸?。?、細(xì)胞形態(tài)、使用的基礎(chǔ)培養(yǎng)基、血清比例、所需細(xì)胞因子、傳代率、換液頻率等。
  4、靜置后,取出細(xì)胞培養(yǎng)瓶,記錄細(xì)胞狀態(tài);建議細(xì)胞繼代培養(yǎng)后定期拍照記錄細(xì)胞生長狀況。
  5、貼壁細(xì)胞:如果細(xì)胞生長密度超過80%,可以正常傳代;如果不超過80%,則將細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的培養(yǎng)基取出,留5ml左右繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)到80%左右,然后進(jìn)行繼代培養(yǎng)操作,瓶蓋可以稍微松開。
  6、細(xì)胞懸浮:將小鼠神經(jīng)星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)瓶中的液體全部轉(zhuǎn)移到50ml無菌離心管中,1200rpm離心5min。離心后,收集上清培養(yǎng)基備用。加入5ml培養(yǎng)基吹干并重懸管底的細(xì)胞沉淀。鏡檢時,若細(xì)胞密度超過80%,可將細(xì)胞懸液分裝于兩個細(xì)胞培養(yǎng)瓶中培養(yǎng),加入培養(yǎng)基至5ml;如果細(xì)胞密度不超過80%,將細(xì)胞懸液移至原瓶中繼續(xù)培養(yǎng),直至細(xì)胞密度達(dá)到80%左右。
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